瑞德旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀對(duì)忽地笑石蒜堿提取工藝優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)

復(fù)合酶法提取忽地笑石蒜堿的工藝優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)，用陽離子交換樹脂分離石蒜堿。以纖維素酶與果膠酶的水溶液為提取溶劑，采用L9( 34 ) 正交試驗(yàn)考察了酶解pH、酶加入量、酶解時(shí)間和酶解溫度等影響因素，以石蒜堿得率為指標(biāo)，得*優(yōu)提取工藝為:料液比1∶10，pH 4．5，酶添加量4%，酶解溫度50℃，提取時(shí)間2．0 h，石蒜堿得率為0．1750%。D-001樹脂純化條件為:上樣液pH為2，以3BV/h流速上樣，以含1 5 mol /L氨水的70%乙醇洗脫，流速為3BV/h，利用瑞德旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀RE-5002初步分離后石蒜堿含量為15．28%。研究結(jié)果可為石蒜堿工業(yè)化生產(chǎn)提供參考。

        Agilent 1260**液相色譜儀；FD5-3型真空冷凍干燥機(jī)；RE-5002旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；AEG-220 型萬分之一天平。

        1 實(shí)驗(yàn)方法

        1．1 酶種類的選擇

        以石蒜堿得率為檢測(cè)指標(biāo)，以忽地笑鱗莖粉末為提取物料，以pH 4．5 的水為提取劑，在料液比( g∶mL) 為1∶10條件下，分別加入3%的纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶、纖維素酶與半纖維素酶復(fù)合酶、纖維素酶與果膠酶復(fù)合酶、半纖維素酶與果膠酶復(fù)合酶、纖維素酶與半纖維素酶及果膠酶復(fù)合酶，50℃浸提2．0h，5000rpm 離心20min，取上清液，定容至50mL，過0．45 μm濾膜后HPLC檢測(cè)。

        1.2 D001樹脂洗脫曲線

        D-001 陽離子樹脂對(duì)石蒜堿的動(dòng)態(tài)洗脫曲線。洗脫至5BV時(shí)，石蒜堿基本洗脫完全，合并0～100mL 洗脫液，用瑞德旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)后真空冷凍干燥，經(jīng)HPLC檢測(cè)，石蒜堿的純度為15．28%。

        2 結(jié)論

        石蒜堿酶法提取的*優(yōu)工藝條件為: 按料液比( g∶mL) 1∶10加入pH為4.5 的水作為提取溶劑，再加入4%的纖維素酶和果膠酶的復(fù)合酶，在50℃水浴提取2．0h，提取3次石蒜堿得率為0．1750%。石蒜堿得率影響的各因素為酶解溫度＞ 酶用量＞ 酶解時(shí)間＞ 酶解pH，酶解溫度對(duì)石蒜堿得率的影響顯著。通過對(duì)石蒜堿的分離純化研究，確定了*佳陽離子交換樹脂分離條件: 以D-001型陽離子交換樹脂進(jìn)行石蒜堿分離，以3BV/h上樣至飽和，以含1. 5mol /L氨水的70%乙醇溶液3 BV/h 進(jìn)行洗脫，洗脫液干燥物中石蒜堿的含量為15．28%。